Protocolo para la transfección de GFP

El uso de la proteína fluorescente verde revolucionó la biología molecular y celular , sino que permitió a los investigadores visualizar células y proteínas en formas nunca antes posibles . Su impacto en la investigación científica era tan profunda que en 2008 Osamu Shimomura ganó el Premio Nobel de Química por su descubrimiento y aislamiento de GFP de la medusa fluorescente. Definiciones

Un gen es la secuencia de ácido desoxirribonucleico en las células que es responsable de la producción de una proteína específica . Un plásmido es una pieza separada de ADN que contiene un gen de interés , tales como las buenas prácticas agrarias . La transfección es el método para la introducción de un plásmido en las células.
Métodos

Transfección típicamente implica la mezcla de un plásmido de ADN que contiene un gen tal como GFP con lípidos o sales . Se exponen las células a esta solución , lo que crea agujeros en la membrana celular , permitiendo que el plásmido en la célula donde el gen se puede expresar como proteína . Kits de transfección comerciales están disponibles , o los reactivos se pueden hacer en un laboratorio . La elección del método de transfección depende del tipo de células y los plásmidos que se utilizan . La GFP se visualizó y monitoreado con un equipo que detecta la fluorescencia.
Usos

GFP normalmente se une a una proteína de interés para la transfección . El Comité Nobel destacó el seguimiento de " daño nervioso celular durante la enfermedad de Alzheimer " y " cómo se crean las células beta productoras de insulina en el páncreas de un embrión en crecimiento ", como ejemplos.