A medida que el número de casos de VIH y SIDA aumentó en todo el mundo , la necesidad de la prueba exacta de VIH se convirtió en esencial. Ahora, después de las pruebas positivas ELISA VIH , los profesionales médicos utilizan una prueba de Western blot para confirmar una infección de VIH positivo . Los médicos diagnostican la enfermedad de Lyme a través de pruebas de Western blot también. La prueba utiliza los métodos de detección intrincados : trabajadores médicos deben transferir muestras de sangre de un gel a una membrana para facilitar el proceso de detección . Para identificar realmente los anticuerpos en la membrana, los trabajadores utilizan enzimas específicas , sustratos y /o fluoróforos . AP Enzima

fosfatasa alcalina ( AP ) constituye una de las enzimas principales en el Western blot . AP tiene un tiempo de reacción lineal, lo que le da una ventaja sobre la detección de otras enzimas. Cuanto más tiempo una reacción AP tiene que ocurrir , más precisa será la prueba. Sin embargo, el período más largo puede recoger otros compuestos químicos y " fondo " ruido , que puede sesgar los resultados de la prueba.

HRP Enzyme

Trabajadores médicos consideran rábano peroxidasa ( HRP) superior a la AP, debido al tamaño del HRP más pequeña, alta tasa de actividad , la compatibilidad con la membrana de reacción , fiabilidad , precio barato y amplia disponibilidad .

cromogénicos Sustratos

los profesionales médicos consideran sustratos cromogénicos mejor para ver la reacción de la membrana interna de la sangre y la enzima . Sustratos cromogénicos no son tan sensibles como otros sustratos y tienden a desaparecer a medida que la mancha se seque . Pero para una confirmación de la prueba visual rápida , sustratos cromogénicos tomar una decisión eficaz. Substratos Blot
quimioluminiscentes Blotting Sustratos

quimioluminiscentes requieren una reacción constante de una prueba exitosa . Si la enzima cesa la actividad o el sustrato está agotado , el resultado de la prueba se pierde . Sin embargo , en una prueba óptima , el resultado de la prueba se convierte en disponible en una a 24 horas. Los trabajadores médicos utilizan equipos de imagen digital o radiografías para ver en realidad el resultado de la prueba , ya que el ojo humano no puede detectarlo.
Fluoróforos

Si los trabajadores médicos no hacen pruebas con enzimas y sus sustratos respectivos , a continuación, se utilizan anticuerpos - fluoróforo conjugado . La prueba fluoróforo requiere menos pasos , pero necesita equipo especial. La prueba requiere una fuente de luz de excitación , lo que provoca la reacción adecuado en la membrana . Fluoróforos y los equipos de iluminación son caros , pero los trabajadores médicos tienen la ventaja de utilizar múltiples fluoróforos en el mismo experimento .