OptiPrep Gradiente Preparación Protocolos

OptiPrep es el nombre comercial para una solución de endotoxina estériles de 60 por ciento iodixanol , un químico originalmente desarrollado como un medio de contraste para rayos X . Las endotoxinas son moléculas estructurales de bacterias, que pueden ser reconocidos por el sistema inmunológico del cuerpo . Laboratorio Noruego Axis-Shield produce esta solución , que se utiliza ampliamente en la investigación biomédica , incluyendo el tráfico de membrana celular de sustancias , así como la genética de virus y bacterias . Protocolo de cloruro de sodio

El OptiPrep de sodio preparación gradiente de cloruro de propósito general , usando cloruro de sodio como el equilibrador osmótica , lo que mantiene la concentración de la solución equilibrada . Los técnicos hacen una solución de trabajo de iodixanol 50 por ciento mediante la dilución de OptiPrep con un diluyente estándar . Se añaden cloruro de sodio 0,85 por ciento o sacarosa 0,25 molar y Tris - hidrochloride a pH 7,4 para la preparación del gradiente. De acuerdo con Axis-Shield , macromoléculas tradicionalmente han sido purificados en gradientes que contienen altas concentraciones de sacarosa , glicerol, sales de metales alcalinos o sales de metales pesados ​​. OptiPrep ofrece la alternativa para aislar bajo soluciones menos concentradas .
Protocolo para el Estudio de VPH

VPH , o virus del papiloma humano , ataca las membranas mucosas , causando verrugas genitales y úlceras que pueden convertirse en tumores. El protocolo de OptiPrep se refiere al estudio del material genético del virus , e incluye la preparación del gradiente de OptiPre . Los técnicos preparan un 46 por ciento preparación gradiente de OptiPrep mediante la mezcla de 70 ml de la OptiPrep , 10 ml de solución salina tamponada con fosfato ( PBS ) , 12,5 ml de cloruro de sodio , 45 microlitros de cloruro de calcio , 25 microlitros de cloruro de magnesio y 210 microlitros de cloruro de potasio . La preparación debe ser protegido de la luz y almacenar a temperatura ambiente hasta por dos meses.
Aislamiento de células dendríticas Protocolo

células dendríticas son parte de la sistema inmunológico de los mamíferos , a menudo presentes en los tejidos cerca de la piel y en el revestimiento interior de algunos órganos , tales como el estómago y los intestinos . El protocolo de células dendríticas utiliza solución de OptiPrep en el proceso de aislamiento de estas células . Técnicos mezclan OptiPrep en una solución de cloruro de sodio y ocho por ciento , tampón Tricina a 7,4 pH y ácido etilendiaminotetraacético (EDTA ) . La preparación de gradiente se puede almacenar en hasta 39.2 grados Fahrenheit durante un mes.