Tetramethylrhodamine acetato de ( TMRE ) es un " , lipófilo , colorante fluorescente catiónico lenta reditribution " utilizado en el Kit de Evaluación de Potencial MitoPT ™ TMRE /TMRM membrana mitocondrial , fabricado por Tecnologías de la inmunoquímica, LLC . El proceso de ayuda para ver un gradiente de potencial eléctrico transmembrana en las células . Preparación del ensayo

El protocolo es sencillo de seguir, y tarda aproximadamente 20 minutos para procesar a 37 grados Celsius. Las células vivas utilizadas en el ensayo pueden tomar entre varias horas y varios días para preparar para su uso . Las células de control pueden tardar varias horas para preparar , ya que necesitan ser inducidas a la apoptosis . Parte 1

células Cultura
Protocolo a una óptima densidad de la apoptosis o el estrés oxidativo por inducción , de acuerdo con el protocolo de inducción específica , pero que no exceda los 10 ( 6 ) células /ml .
Protocolo Parte 2
p Al mismo tiempo, la cultura de una población no inducida control negativo de células (en la misma densidad que la población inducida.
Protocolo Parte 3

inducir la apoptosis o intencionalmente despolarizar las mitocondrias siguiente el protocolo deseado .
Protocolo Parte 4

Preparar 1X Ensayo /Wash Buffer .
Protocolo Parts 5-8

Prepare el 1 mM o 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM valores. Para Protocolo Parte 6 , preparar una dilución 1:100 del 1 mM, o una dilución 1:20 del mM MitoPT ™ TMRE /TMRM 0.2 solución para clavar en muestras de cultivo de células.

para Protocolo Parte 7 , las células de la mancha usando una concentración final de 20-200 nM de solución MitoPT ™ TMRE /TMRM .

para Protocolo Parte 8 , analizar la datos.