Cómo realizar una prueba de Allium Cepa

Cebolla ( Allium cepa ) se utilizan para evaluar los riesgos ambientales al permitir que las raíces en desarrollo entren en contacto con las sustancias a ensayar . Después de la exposición suficiente , las raíces se sacan , se tiñen y se maceran para que los cromosomas de células se pueden ver con un microscopio óptico . La toxicidad se manifiesta si se detectan anomalías cromosómicas o anomalías de la división celular . Puntas de las raíces se utilizan porque las células allí están creciendo y dividiendo activamente , dando una buena oportunidad para ver los cromosomas durante las diferentes etapas de la división celular. Cosas que necesitará
Cebollas
Cuchillo agua
Beakers u otros recipientes para contener líquidos y cebollas
Prueba líquidos
Hoja de afeitar o bisturí
Viales
Aceto - fijador alcohol
Portaobjetos Cubreobjetos
ácido clorhídrico

acero inoxidable barra de maceración
carbol mancha fucsina
mancha Aceto - orcein
ácido acético area Canadá bálsamo
microscopio de luz
apego de la cámara para microscopio
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Configuración de la prueba de Matemáticas 1

quitar la piel seca exterior de 12 cebollas. Raspe la parte inferior de la cebolla alrededor de las placas de fondo sin dañar la zona de la que surgirán las raíces.
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Seleccionar vasos que tienen una boca lo suficiente para sostener la parte inferior de la cebolla inmersos en la prueba líquidos. Llenar los vasos con agua destilada y colocar la cebolla en los vasos en contacto con el agua. Cubra los lados de los vasos con papel de aluminio para simular la oscuridad subterránea. Cambie el agua diariamente .
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Examine las bases de cebolla después de dos días. Las raíces deben haberse formado . Evaluar el crecimiento de las raíces y deseche los dos cebollas con el crecimiento de las raíces más débil.
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Configurar una segunda serie de cinco vasos de precipitados conteniendo cada uno una muestra del material a analizar, tales como aguas residuales o desechos industriales . Pon en juego cinco de las cebollas en estos vasos . Conserve los otros cinco en agua destilada como control de la prueba. Permita que las raíces crezcan durante otras 24 horas.
Preparar las Raíces
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Con un bisturí o cuchilla de afeitar , cosecha cinco y cincuenta y cinco puntas de las raíces de cada una cebolla , la grabación que eran los controles y que estaban sujetos de prueba . Mantener las raíces de la cebolla individuales separados en pequeños frascos etiquetados.
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puntas de las raíces Fix inmediatamente en aceto - alcohol en una proporción de 1:3 . Coloque las puntas de las raíces de una cebolla en un portaobjetos de microscopio y macerar en ácido clorhídrico 1 N , que es el mismo como ácido clorhídrico 1 molar , a 60 grados centígrados durante tres minutos . Stain consejos maceradas con mancha carbolfucsina , una mezcla de fenol y fucsina básica que se une a los elementos de las paredes celulares de modo que se hacen más visibles bajo microscopio de luz .
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Añadir 2 por ciento mancha aceto - orceína en 4 ácido acético por ciento . Estos colores los cromosomas. Agitar con la varilla de maceración . Aplicar una hoja de cubierta , presionando hacia abajo para aplastar las puntas de las raíces . Selle los bordes con rápido secado esmalte de uñas o montar permanentemente las preparaciones en bálsamo de Canadá , la resina del árbol de abeto balsámico mezclado tanto con aceites esenciales o xileno. Número de las diapositivas de modo se registrarán los resultados, pero no es evidente si cada uno es un sujeto de prueba o un control.

Resultados Grabación
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Coloque el portaobjetos de un microscopio en el escenario de un microscopio de luz . Examine el campo bajo un aumento menor , el cambio a mayores aumentos para examinar cromosomas.
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Registre las aberraciones cromosómicas en una hoja de datos, el registro de información por el número codificado para cada cebolla. Incluya cromosomas incompletamente separados o rotos, micronúcleos (núcleos adicionales formaron cerca del final de la división celular que puede contener restos cromosómica ) , anillos de cromosomas y los cromosomas pegajosas y perturbados en diferentes etapas de la división celular. Fotografiar cada diapositiva.
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Analizar los datos mediante el análisis estadístico. Interpretar los resultados para evaluar si es o no la solución de prueba es genotóxico .