Cómo determinar Anticuerpos

La prueba ELISA o prueba de inmunoensayo ligado a enzimas , es la prueba de uso comercial más común para detectar la presencia de anticuerpos . Esta prueba se utiliza para detectar el consumo de drogas , el embarazo , el SIDA y la hepatitis , entre otras condiciones . Esta prueba es muy popular debido a la facilidad de uso y bajo costo. Cosas que necesitará
muestra de suero
ELISA Plate Foto de antígenos que conjugar el anticuerpo se está probando para
anticuerpos unidos de enzimas o anticuerpos secundarios
Enzyme Linked cambio de color del indicador
toallas de papel
Gafas de
Mostrar Más instrucciones Matemáticas 1

Deja un antígeno conocido sobre la superficie de varios de los pozos.

cubierta cada pocillo con 50 microlitros de fluido IgG. No moleste a los pozos de hasta 5 minutos han pasado . Enjuague los pozos con agua del grifo. Repita el proceso de lavado cinco veces. Toque el bien en una toalla de papel para secarlo. No limpie los pozos.
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Añadir muestras de fluidos corporales , llamados suero , a las placas. Estas muestras de fluidos corporales pueden contener la solución de conjugado y competidor a los pocillos. Esto se unirá si los anticuerpos están presentes. Las muestras de suero se deben diluir para que puedan conjugar el antígeno a la aplicada en el paso 1 .
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Añadir una proteína , tal como caseína , a los pocillos. Esto evitará que otras proteínas que no están en estudio para se adhiera a la placa.
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Lavar la placa de un enjuague con agua del grifo vierte suavemente sobre los pozos. Luego, toque el lado de la placa sobre una toalla de papel para eliminar el exceso de agua . Repita el proceso de lavado cuatro veces más. No limpie los pozos. Añadir el anticuerpo que coincide con el que está siendo probado por los pozos.
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Lavar la placa de un enjuague con agua del grifo vierte suavemente sobre los pozos. Luego, toque el lado de la placa sobre una toalla de papel para eliminar el exceso de agua . No limpie los pozos. Repita el proceso de lavado cuatro veces más. Este proceso de lavado eliminará cualquier antígeno que no está unida del pozo . Los pocillos contienen sólo los complejos antígeno- anticuerpo que se están probando para . Lavar la placa . Esto eliminará cualquier conjugados enzima-anticuerpo no unidos .
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Agregar secundaria de anticuerpos , también llamados anti- anticuerpos , a los pocillos. Estos se adhieren a los anticuerpos de detección . La secundaria de anticuerpos se conjugan con el indicador de cambio de color, y para el antígeno que se ha añadido al pozo en el paso 1 .
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Lavar la placa de un enjuague con agua del grifo vierte suavemente sobre los pozos. Luego, toque el lado de la placa sobre una toalla de papel para eliminar el exceso de agua . No limpie los pozos. Repita el proceso de lavado cuatro veces más. Esto eliminará los anticuerpos adicionales de enzimas vinculadas que no están vinculados .
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Aplicar un indicador de cambio de color ligado enzima a la placa.

Esto hará que los pozos que tienen los anticuerpos que son probado para cambiar el color.
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Observe los pocillos de la placa para un cambio de color , lo que indica la presencia del anticuerpo en la muestra de fluido corporal .