Tissue activador del plasminógeno o TPA es un tipo de serina proteasa, que es la proteína capaz de destruir coágulos de sangre. TPA se encuentra en las células que cubren internamente los vasos sanguíneos. Protocolos de ATR son parte de la investigación farmacéutica y médica en trazos, así como enfermedades del corazón y de los pulmones, tales como embolia pulmonar e infarto de miocardio. Purificación de TPA se refiere al aislamiento de esta proteína a partir de otras moléculas a través de una serie de procesos, que incluyen cromatografía y electroforesis. La purificación del TPA a partir del riñón del cerdo

Este protocolo se utiliza en los estudios de la fibrinólisis, el proceso de romper el producto de la coagulación llamada fibrina, relacionada con la formación de tumores. Los técnicos extraen TPA a partir de riñón de cerdo secada en acetona con tampón de acetato de potasio, a un pH de 4,2. A continuación, se añaden sulfato de amonio para inducir la precipitación de células. Añaden n-butil-sefarosa a las muestras, que luego se analizan en un cromatógrafo. Concanavalina También se añade un chromatograph.y y para separar diferentes proteínas se lleva a cabo.
La purificación del TPA a partir de ovario de hámster chino y células de E. coli
pureza de la proteína es un

factor importante en el éxito de los experimentos biológicos. TPA purificado también está disponible comercialmente, ahorrando así tiempo y evitando el riesgo de poner en peligro el experimento debido a la solución de mal purificada. Este protocolo implica los procesos de purificación de TPA en mamífero y células bacterianas. Los técnicos precipitan muestras de células, filtrado ellos y realizar análisis de afinidad y cromatografía en gel. Más tarde, se analizan y comparan los resultados, antes de la producción comercial.
Expresión de activo TPA humano en E. coli

lisados ​​celulares clarificados se añaden a una lisina - Sepharose, analizados en un cromatógrafo y se lavó con una solución de cloruro de sodio. Otra muestra se cargó en una columna de cromatografía de segundos que contiene proteínas que se unen a TPA con una afinidad muy alta. Una muestra de la segunda columna se mezcla con una solución de zinc-sefarosa. La proteína resultante muestra una pureza de más del 90 por ciento, según la revista "Applied and Environmental Microbiology."