biotinilación utiliza la capacidad de la vitamina soluble en biotina para unirse a proteínas de la célula. La biotina se une a la proteína estreptavidina y es, por lo tanto, útil en biología celular para visualizar las proteínas celulares. La biotinilación permite el etiquetado segura de proteínas en comparación con técnicas como la radiactividad y no afecta a la función normal de la célula. Se permite a los investigadores estudiar las proteínas celulares tales como receptores, y que permite una mayor comprensión de enfermedades y procesos patológicos. Etiquetado de las células en suspensión
Lavar las células

en fosfato enfriada con hielo de solución salina tamponada (PBS) para eliminar los contaminantes. Tampones contienen tris y glicina competirán con biotinilación y deben evitarse. Para evitar biotinilación proteínas internas, el etiquetado puede llevarse a cabo a 4 grados Celsius o en presencia de azida. Resuspender las células en PBS y la biotina soluble, sulfo-NHS-LC-biotina.
Etiquetado de las células adherentes

Lavar las células en PBS y se incuba con un producto como sulfo -NHS-LC-biotina. Las células se raspó en un plato y se lisaron en un tampón que contiene el detergente Triton X-100 y se prepararon para la visualización.
Preparación células marcadas

Siguiendo de incubación, las células se centrifugan en un sedimento y se lavaron en PBS. Las células se resuspendieron en PBS y se purificaron con el gel de sefarosa IgG. La proteína unida se diluye en tampón de carga y se calienta a 100 grados centígrados.
Visualización de células

proteínas diluidas se puede visualizar utilizando electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS- PAGE) seguido por Blot con la proteína y la enzima de la mezcla, peróxido de estreptavidina-rábano picante. Las transferencias se visualizan con una reacción química --- quimioluminiscencia --- que emite luz. La especificidad de la biotinilación se puede confirmar con anticuerpos para la proteína en estudio.