El ensayo de unión competitiva es un experimento que determina la capacidad de unión de proteínas o productos químicos para proteínas especializadas que se encuentran en una superficie de la célula , llamados receptores . El método se utiliza a menudo en la investigación médica , pero también es capaz de determinar qué fármacos se unen a los receptores y modificar la actividad del receptor , que a su vez puede alterar el comportamiento celular . Preparación de células

volver a suspender las células en fosfato helada buffer salino ( PBS). Medida de la concentración de proteína para confirmar la igualdad de los niveles de proteína mediante el uso de un ensayo de proteína disponible en el comercio especializado .
Ensayo

Añadir una proteína marcada con radiactividad sabe que se une al receptor , la ligando , a la célula o suspensión de tejido . Añadir el competidor , que es el fármaco de ensayo o la proteína en estudio y se incuba con el ligando radiactivo y la suspensión de células . Un intervalo de concentraciones del fármaco de ensayo debe ser estudiado . Después de la incubación , ligando independiente unido y sin unir y medir la radioactividad.
Data Analysis

La medida habitual para determinar es la mitad de la máxima concentración que inhibe el receptor también conocido como CI50 . Esto se calcula mediante el trazado de las concentraciones sobre una escala logarítmica en el eje X de un gráfico mientras que el eje Y representa el porcentaje de inhibición ; una curva sigmoidea , que es una forma de S , debe ser generada . La IC50 es el punto de inhibición del 50 por ciento, y la concentración correspondiente se puede leer en el gráfico .