Fundamentos de PCR

Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es un método de replicación del ADN. El método se nombra después de la ADN polimerasa, una enzima usada para catalizar el proceso de replicación del ADN. Kary Mullis desarrolló la técnica en 1984 y fue galardonado con el Premio Nobel de Química por su trabajo en 1993. Aplicaciones de la PCR

aplicaciones comunes de PCR incluyen huellas de ADN (en el que los fragmentos de ADN se aíslan y se comparan con los datos existentes), análisis de cantidades extremadamente pequeñas de muestra (que permite a los científicos reconstruir organismos extintos y los fallecidos históricos cifras) y diagnóstico de enfermedades (incluido el ADN viral y la investigación del cáncer)
PCR Componentes

componentes y reactivos de una reacción de PCR necesarios son los siguientes:. ADN genómico (la plantilla replicar); dos cebadores (uno hacia delante y uno inverso) complementarios a la secuencia de molde de ADN; un cóctel de reacción (incluyendo la polimerasa Taq y una solución tampón que proporciona un entorno viable en la que se producirá la reacción), y el sustrato para la enzima Taq . (nucleótidos que ayuden a "construir" las hebras individuales)
pasos de PCR

Los pasos de la reacción son: desnaturalización (durante el cual la temperatura es planteado para separar las hebras del molde de ADN); recocido del cebador (durante el cual la temperatura se enfría a animar a secuencias de cebadores de flotación libre a que se adhieran a aislados hebras del molde de ADN), y extensión (durante el cual los polimerasa Taq se adhiere a la imprimación y la libre utilización nucleótidos flotantes para replicar cada uno aislado cadena molde de ADN). La repetición de este proceso varias veces aislará cada secuencia replicada a partir de su plantilla de ADN original. Cada repetición aumenta exponencialmente la cantidad de ADN replicado hasta que haya una cantidad suficiente para el experimento deseado. Para la temperatura óptima y otras condiciones, consulte "Diseño de programas de PCR" de la Universidad de Yale en los recursos, a continuación.
Etapas de PCR

La reacción también se puede describir en tres etapas : Amplificación (durante la cual el ADN se replica de forma exponencial); Nivel-Off (durante el cual la Taq polimerasa pierde actividad), y la meseta (momento en el que no más producto puede ser producido en la reacción actual). Para una demostración interactiva de la reacción de PCR, véase Universidad de "PCR Laboratorio Virtual" de Utah en los recursos, a continuación.