Microscopio de luz ordinaria no puede ser utilizado para observar un tejido tridimensional sin seccionar físicamente la muestra. Microscopía confocal de barrido, sin embargo, es un método de observación alternativa que proporciona una manera más directa de ver la arquitectura tridimensional de un todo, la muestra de unsectioned. Métodos de imagen electrónicos permiten al usuario centrarse en un plano dado en una muestra de espesor, mientras que rechazar la luz que viene de arriba y por debajo del plano de enfoque. ¿Por qué Microscopía confocal?

Microscopía confocal de barrido es utilizado por los investigadores en la ciencia biológica y otras industrias para obtener una imagen de la arquitectura tridimensional de un espécimen, tal como una célula o tejido. Además, el procedimiento se utiliza para observar la estructura microscópica de una muestra que por alguna razón no puede ser cortado en secciones de antemano. A pesar de estos retos pueden cumplirse mediante el uso de un programa de procesamiento de imágenes por computadora compleja, este método es lento y requiere una gran cantidad de potencia de cálculo.
Microscopía Confocal Microscopy vs Luz Estándar

Si una muestra de espesor es vista con un microscopio de luz convencional, la imagen obtenida, centrándose en cualquier plano específico se ve agravada por las lecturas borrosa, fuera de foco que vienen de las partes de la muestra que está por encima y por debajo el plano de enfoque. Por microscopía de luz ordinaria para trabajar bien, una muestra debe ser cortada en secciones delgadas para ser analizados, y el espesor de la sección es inversamente proporcional a la claridad de la imagen. Sin embargo, posiblemente información valiosa acerca de la tercera dimensión se pierde cuando una muestra es seccionado y, como se mencionó, algunas muestras no pueden ser seccionados fácil en absoluto.
Cómo funciona

El microscopio confocal de barrido se centra en un plano específico en una muestra de espesor, mientras que rechazar la luz que proviene de las regiones fuera de foco por encima y por debajo de ese plano. Esto resulta en una "sección óptica," limpio y de una secuencia de estas secciones tomadas a diferentes profundidades, un programa de ordenador pueden reconstruir una imagen tridimensional. Esta estrategia es muy similar a lo que un escáner CAT hace por radiólogos que investigan un cuerpo humano completo, ya que ambos métodos presentan vistas en sección limpia del interior de una estructura intacta
Cómo funciona:. Los detalles

El dispositivo se utiliza generalmente con óptica de fluorescencia, y en cualquier instante sistema óptico de la máquina centra su atención en un solo punto a una cierta profundidad en la muestra. Se necesita una fuente muy brillante de la punta de iluminación, lo que se suele realizar mediante un láser, cuya luz pasa a través de un pequeño agujero. Un detector provisto de una abertura del agujero de alfiler recoge la fluorescencia emitida desde la muestra iluminada. Sólo la luz del punto de enfoque específico entra en el detector y el dispositivo no incluye la luz proveniente de las áreas fuera del plano de enfoque.
Usos específicos

confocal de barrido microscopio se utiliza a menudo para resolver la estructura de diversos objetos tridimensionales complejas, tales como las redes de fibras de citoesqueleto en el citoplasma de las células, y los arreglos de cromosomas y genes en el núcleo de una célula durante diferentes puntos en el ciclo de división celular. Los granos de polen, por ejemplo, tienen una pared celular esculpido complejo, que sólo se puede ver con claridad el uso de la microscopía confocal. La industria de la electrónica también utiliza esta máquina y la metodología para inspeccionar los semiconductores.