Cómo preparar las placas de agar

Biología Molecular y bacteriología utilizan placas de agar de cultivos de microorganismos como las bacterias para la experimentación. El agar es el agente que se solidifica, o geles, un medio nutriente líquido requerido por el microorganismo para sobrevivir y crecer. Una vez transferido a una placa de agar, las bacterias crecen en colonias distintos (si cultiva a bajas concentraciones) o frotis (cuando se cultiven en altas concentraciones) y pueden ser cosechadas para el análisis. Los biólogos preparan placas de agar, como el proceso requiere el acceso a los reactivos de grado de laboratorio y máquinas para una buena comprensión de la biología molecular y técnicas estériles. Cosas que necesitará Guantes

Lab Escudo de Face Mask of Mechero Bunsen
campana de flujo laminar estéril
platos
10 g Bacto-triptona
5 g de extracto de levadura petri
15 g de agarosa
1 ml de NaOH 1N
agua destilada estéril
Glass Bottle | Autoclave cinta
Autoclave
suplementos, por ejemplo, antibióticos como la ampicilina
Ver Más instrucciones
1

Use el equipo adecuado de protección, incluyendo guantes, una bata y una mascarilla y descontaminar todas las superficies. El trabajo al lado de un mechero Bunsen o, preferiblemente, en una campana de flujo laminar estéril. Esto evita que los contaminantes del aire de caer en el agar.
2

Extraiga la pila de placas de Petri de su embalaje, pero ahorrar para reenvasado en las placas de agar. Etiqueta de la superficie externa del plato (no la tapa) con el tipo de agar y la fecha de preparación. Colocar las placas a cabo como una sola capa con las tapas retiradas para hacer verter el agar de más fácil.
3

Mezclar la Bacto-triptona, extracto de levadura y agarosa juntos y a continuación, añadir el hidróxido de sodio (NaOH). Añadir agua destilada estéril para obtener 1 litro de medio nutritivo. Transferir dicha solución a una botella de vidrio con al menos 1,5 l de volumen. Sin apretar el tornillo de la tapa de la botella y la etiqueta la fecha de preparación y el nombre de los medios de comunicación. Coloque una tira de cinta de autoclave en el frasco y esterilizar en autoclave durante 25 minutos. Deje la botella fría para no menos de 45 grados Celsius (o se endurecerá antes de tiempo), pero no más de 50 grados centígrados. Puede almacenar botellas de agar enfriado y solidificado a 4 grados centígrados y luego se calienta hasta que la miel. Si es necesario para su experimento o cepa de la bacteria en particular, agregue el tipo y la cantidad de suplemento, como los antibióticos apropiados. Si el material está demasiado caliente, se destruirán los suplementos, a fin de comprobar cuidadosamente la temperatura de los medios de comunicación antes de continuar.
4

Verter un volumen suficiente de agar al medio-llenar el plato, mientras que el agar es aún caliente y licuados. Asegúrese de que la superficie quede completamente cubierto. No vierta una cantidad excesiva o dejar que el agar llegar a la parte superior del plato. Mantener las placas en un ambiente estéril al permitir que el mechero Bunsen o campana de flujo laminar para funcionar continuamente. Permitir que las placas se fijan y vuelva a colocar la tapa.
5

Secar las placas de agar durante unos 30 minutos a una hora en un horno no más de 37 grados Celsius. Como alternativa, puede dejarlos en la campana de flujo laminar durante tres minutos o en una mesa de laboratorio descontaminado en una zona con poco tráfico, que no es con corrientes de aire durante un día o dos. El secado de las placas se detiene cualquier solución bacteriana colocado sobre la superficie de agar de simplemente diluyendo y deslizando, en lugar de formar colonias que se pegan al agar.
6

almacenar cuidadosamente las placas en la oscuridad y en 4 grados centígrados. Pila de las placas de agar secos con sus fondos hasta que pueda ver claramente las etiquetas y para evitar que los microorganismos y los escombros caigan sobre la superficie de agar y contaminarlos. Coloque los platos de nuevo en su embalaje, cubrir con papel de aluminio y cinta del cierre de envases. Etiquetar las placas llenas de su contenido y la fecha de preparación. Puede almacenar las placas para un máximo de dos meses, y debe deshacerse de ellos después de eso.