Cómo realizar Tasa asimetría en los genomas
líneas celulares de fibroblastos humanos
Mantenimiento medio
gamma y radiación UV Fuente y centrífuga
Incubadora
buffer fosfato salino
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1
Se incuban las líneas celulares de fibroblastos humanos en un medio que contiene productos químicos, tales como la timidina, la penicilina, glutamina y suero bovino fetal a 37 grados Fahrenheit en una cámara incubadora con 5 por ciento de dióxido de carbono.
2
Expose las líneas celulares a las fuentes de luz con rayos gamma y la radiación ultravioleta durante 30 minutos. Coloque las líneas de células de nuevo en la incubadora durante 18 a 24 horas.
3
Haga suspensiones de los cultivos de células en medio de cultivo fresco y se incuba de nuevo durante uno o dos horas en la incubadora.
4
Utilizar el método de sedimentación sacarosa alcalina para estudiar la estabilidad y la estructura del ADN. Diluir las células en 20 volúmenes de solución salina tamponada con fosfato y se centrifuga a 1000 revoluciones por minuto durante cuatro minutos en un ángulo de 4 grados. Mezclar la solución con hidróxido de sodio y cloruro de sodio, y luego identificar la fase de crecimiento del ADN y la estructura de los cambios.