Cuál es la función de seguimiento de tinte en electroforesis en gel?
Para separar los fragmentos de ADN, para el propósito de medir su tamaño o para aislar un fragmento en particular, los científicos puso ADN en un gel de agarosa sumergidos en una solución que se carga con una corriente eléctrica. La corriente empuja los fragmentos de ADN a través del gel, y debido a que el gel es porosa, fragmentos de ADN más pequeño gusano de su camino a través de más rápidamente. Viajan más allá de los fragmentos más grandes en la misma cantidad de tiempo.
Propósito
ADN es incoloro cuando se encuentra en solución en un tubo de ensayo. Para hacer la muestra más fáciles de ver, tanto en el tubo de ensayo y en el gel, se añade un tinte de color para el seguimiento de la muestra. El tinte no afecta al ADN en absoluto.
Seguimiento
El tinte de seguimiento habitual es azul de bromofenol en una solución de glicerol al 50 por ciento. Colores azul de bromofenol la muestra azul brillante de modo que es fácil para realizar un seguimiento de su progreso a través del gel. Cuando el colorante de rastreo ha viajado alrededor de 3/4 de la longitud del gel, es hora de apagar la corriente eléctrica.
Densidad
El tinte de seguimiento es densa debido a su alta concentración de glicerol. Eso hace que las muestras de ADN se hunden en las ranuras de carga del gel, en lugar de flotando en la solución por encima del gel que transporta la corriente eléctrica.
Tinte migración
azul de bromofenol migra a través de una solución de agarosa a aproximadamente la misma velocidad que una cadena de ADN que contiene 300 pares de bases. Si desea realizar un seguimiento del progreso de grandes cadenas de ADN, se puede utilizar un tinte de seguimiento con xilenocianol, que migra a la misma velocidad que una cadena de ADN con 4000 pares de bases.