criopreservadas células mononucleares de sangre periférica PBMC (PBMC) son una fuente frecuente de especímenes para la investigación que incluye inmunoterapias y las respuestas a las vacunas. Mientras que algunos protocolos se limitan al aislamiento y las fases de congelación del proceso, otros incluyen los procedimientos de descongelación. Procedimiento de aislamiento y procedimiento de congelación

Un compuesto comercial para promover la separación se coloca en cada tubo de centrífuga de 50 ml y los tubos se centrifugaron durante treinta segundos. Tapas de tubos de sangre se rocían con alcohol antes de abrir, a continuación, la sangre entera tratada con anticoagulante se transfiere a través de la pipeta en los tubos de centrífuga. La capa de plasma de la sangre de la que se aspira con una pipeta.
Congelación

Las células procedentes de la etapa anterior A continuación, se centrifugó con tampón salino tres veces. Después de un recuento de células, las muestras se centrifugaron después se suspendió en medio de congelación. Los especímenes en el medio de congelación se junto dividen entre crioviales en una cantidad mL. Los viales se almacenaron durante la noche en una

-70 º C congelador y se trasladó a un almacenamiento a largo plazo en nitrógeno líquido al día siguiente.
Safe descongelación

crioviales se transfieren a partir de nitrógeno líquido a un baño de agua a 37 º C y la muestra se dejaron descongelar uno a dos minutos. Una cálida medios de transporte se añaden a cada vial. Suspensión celular diluida se centrifugó durante siete minutos. El número y la viabilidad celular se comprueban, Si las células necesitan para concentrarse, las muestras se centrifugan siete minutos más. La muestra se diluye con solución de trabajo y descanso de doce a dieciocho horas antes de comenzar el examen en el protocolo especificado

Referencias
  BioMed Central:. Protocolo para el aislamiento , criopreservación y descongelación de PBMCs
Network   de páncreas donantes de órganos con Diabetes: Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica (CMSP)
Recursos
  Los Almos National Labs: ensayo de anticuerpos Soluciones en PBMC
  científicos ': Aislamiento de linfocitos de sangre total.