tetrametilrodamina acetato de (TMRE) es un "lento, lipófilo, tinte catiónico reditribution fluorescente" se utiliza en el Kit de MitoPT ™ TMRE /TMRM Potencial de Membrana Mitocondrial Evaluación, fabricado por inmunoquímica Technologies, LLC. El proceso ayuda a ver una transmembrana gradiente de potencial eléctrico en las células. Preparación del ensayo

El protocolo es fácil de seguir, y toma aproximadamente 20 minutos para procesar a 37 grados centígrados. Las células vivas utilizadas en el ensayo pueden tomar entre varias horas y varios días para preparar para su uso. Las células de control pueden tardar varias horas para preparar, ya que necesitan ser inducidas a la apoptosis.
Protocolo 1
células Cultura

Parte de una densidad óptima para la apoptosis o inducción de estrés oxidativo, de acuerdo con el protocolo de inducción específica, pero que no exceda de 10 (6) células /ml.
Protocolo Parte 2
p Al mismo tiempo, la cultura de una población de células control negativo no inducidos (en la misma densidad que la población inducida.
Protocolo Parte 3

inducir la apoptosis o intencionalmente despolarizar la siguiente mitocondrias el protocolo deseado.
Protocolo Parte 4

Prepare 1X Ensayo /tampón de lavado.
Protocolo Parts 5-8

Prepare el 1 mM o 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM valores. Protocolo para la Parte 6, preparar una dilución 1:100 del 1 mM, o una dilución 1:20 del 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM solución para clavar en muestras de cultivo celular.

Para Protocolo Parte 7, las células mancha con una concentración final de 20-200 nM MitoPT ™ solución TMRE /TMRM.

Para Protocolo Parte 8, analizar la datos.