Las manchas de Hoechst son tintes fluorescentes utilizados para el marcaje de ADN y ARN a través de técnicas de microscopía de fluorescencia y citometría de flujo. Hoechst 33258 y Hoechst 33342 es el más utilizado de estas manchas. Tienen la capacidad de unirse a moléculas de ADN, causando los núcleos y mitocondrias que aparezcan fluorescente bajo luz ultravioleta. Los protocolos para la tinción de Hoechst son una práctica común en los laboratorios de biotecnología y genética, e incluyen técnicas de tinción de células utilizando tanto Hoechst 33258 y Hoechst 33342. Hoechst 33342 tinción HSC y células madre Purificación Protocolo

Este protocolo se utiliza para teñir las células de médula ósea de ratón. Los técnicos preparan muestra de médula ósea con HBSS + solución de sal, tampón HEPES y suero de ternera fetal. Hacen girar la solución y se añaden a un medio DMEM precalentado. A continuación se añade Hoechst mancha. La solución se coloca en un baño de agua a grados Fahrenheit 98,6 por exactamente 90 minutos, según informa el Departamento de Inmunología de la Universidad de Pittsburgh. Segmentos de ADN aparecen fluorescente bajo un citómetro.
Hoechst 33342 tinción DNA

En este protocolo, los técnicos suspendidos Hoechst 33342 tinción en agua destilada, añadir 2 por ciento de suero fetal bovino al la muestra de células, manteniendo el pH a 7,2 con la ayuda de una solución tampón. Las células se incubaron a 98,6 grados F durante una hora, y de inmediato se analizaron con un equipo llamado citómetro.
ADN Stained

es entonces visible y fluorescentes, de acuerdo con la Universidad de Michigan Health System.


Detección de ADN Utilizando el ADN vinculante fluorocromo Hoechst 33258

Este protocolo utiliza un aparato llamado espectrofotómetro para análisis de ADN y ARN segmentos. Los técnicos utilizan Hoechst 33258 solución de trabajo y de timo de ternera muestras de ADN. Ellos también hacen una solución separada con la muestra de ADN y un químico llamado bromuro de etidio. Posteriormente, se comparan los resultados de la tinción de células en ambos medios, utilizando un espectrofotómetro, de acuerdo a los protocolos actuales en Citometría.