El cultivo de tejidos es la propagación de las células en un medio de crecimiento líquido en el laboratorio para diversos fines científicos. Por ejemplo, los cultivos de tejidos se utilizan en el diagnóstico de las enfermedades genéticas, como un medio para el crecimiento de patógenos intracelulares tales como bacterias o virus o en las investigaciones sobre las propias células. Células de cultivo tisular

Algunas células se adhieren a la parte inferior de placas de Petri o permanecen suspendidas en el líquido. Las células pueden ser de origen vegetal o animal. Las células utilizadas en cultivos de tejidos pueden ser células primarias, lo que significa que se recogieron directamente de un organismo, o de una línea celular que se ha mantenido en cultivo. Las líneas celulares son a menudo las células cancerosas, y esto debe tenerse en cuenta en la planificación o la interpretación de los experimentos.
Células Tratar con cuidado
células adherentes

se quitan de su placa de Petri para el paso por raspar o con una proteasa, generalmente tripsina y EDTA. Raspar mata muchas células y se debe usar sólo cuando la preparación de lisados ​​de células (preparados líquidos de contenido de la celda para el análisis) o cuando tripsina /EDTA absolutamente debe ser evitado.

Trypsinizing elimina no sólo las proteínas de las células que se adhieren al plato pero la mayoría de otras proteínas en la membrana de la célula, también. Las células pelota y tomar algo de tiempo, por lo general durante la noche, para restablecer un vínculo con el plato. Adición de una cantidad mínima de tripsina - alrededor de 1 ml para un matraz de 25cm2 - mecedora el matraz durante cinco segundos o menos para recubrir la monocapa y luego vertiendo o aspirar el exceso de tripsina reducirá la cantidad de tripsina al que se expone la monocapa. Dejar reposar las células en la incubadora durante el tratamiento con tripsina.

Vez que las células se deslizan fuera de la parte inferior del plato, añadir medio con suero y aspirar el lisado de arriba a abajo la pipeta suavemente. Deje un poco de los medios para permanecer en el plato como pipeta hacia arriba y abajo varias veces para separar las matas y obtener una suspensión uniforme.

No chupar burbujas en la pipeta. Además, no se mezcla vigorosamente o vórtice de la suspensión celular,. Las células son muy frágiles en este estado balled-up
para calentar Desactivar o No inactive por calor

Cuando las técnicas de cultivo de células estaban en su infancia, suero fetal bovino (FBS) se sabe que contienen las proteínas del complemento, que son proteínas del sistema inmunitario que lisan las células. Las proteínas del complemento no son deseables en el cultivo celular. El calor de inactivación FBS a 56 grados centígrados durante 30 minutos hará que las proteínas del complemento inactivo. Precalentamiento FBS a 37 grados C también es suficiente para inactivar las proteínas del complemento.

En los primeros días, el calor inactiva FBS también mataron micoplasmas y otros contaminantes. En el momento, la esterilización de filtro se realiza con filtros 0.45um. Hoy, filtro de esterilizar FBS y los medios a través de filtros 0.1um o 0.04um. No micoplasma se deslizará a través de ese

Esto nos deja la cuestión de si o no para calentar inactivar

inactivación por calor degrada todos los componentes del FBS -.. Tales como vitaminas, aminoácidos y factores de crecimiento -. posiblemente por debajo del umbral de algunas líneas celulares melindrosos

Si está trabajando con una línea de células de crecimiento lento y meticuloso, considere simplemente filtrar esterilizar el FBS. Usted puede encontrar lo que aumenta la solidez de sus células.