Electroforesis en gel de agarosa es el método más común de análisis de fragmentos de ADN visual, lo que permite a los técnicos a discernir visualmente fragmentos de ADN basada en el tamaño. El gel de agarosa sostiene un campo magnético y, ya que el ADN tiene una carga negativa, se mueve hacia el extremo positivo del campo magnético. Fragmentos de ADN más pequeñas se mueven más rápidamente a través del gel y los fragmentos más grandes se mueven más lentamente. Fragmentos de ADN fluorescente se tiñeron con un agente de intercalación conocido como bromuro de etidio. Esto permite la comparación de varias muestras de ADN a electroforesis en un gel. Cosas que necesitará
en gel de agarosa, un 0,7 por ciento a 2 por ciento
Tris-borato-EDTA (TBA), tris-acetato-EDTA (TAE), acetato de sodio, litio (LA), ácido bórico (SB) de amortiguación
bromuro de etidio
Gel carga de colorante
Gel bandeja
Cámara de electroforesis

Guantes de protección para los ojos
pipeta
electroforesis peine
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Preparación de un 0,7 por ciento en gel de agarosa
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Pesar 0,7 gramos de polvo de agarosa y luego se coloca en un gran matraz cónico (250 ml).
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Añada 100ml de un 1X (fuerza regular) tampón (TAE, TBE, SB o tampón LB) al matraz cónico que contiene el polvo de agarosa.
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microondas o calor mediante un mechero Bunsen durante aproximadamente un minutos hasta que la solución se vuelva clara y la agarosa se disuelva.
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Retirar el matraz de la fuente de calor y deje que se enfríe a 55 a 60 grados centígrados.
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Añadir 1 l (microlitros) de bromuro de etidio a la solución de agarosa enfriada usando una pipeta de tamaño adecuado, generalmente 1 ml. Remolino para mezclar la solución.
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Verter lentamente el gel en la bandeja de gel, asegurándose de que no hay formación de burbujas durante este proceso. Si hay presas así no suministradas con la bandeja de gel, utilice cinta adhesiva para formarlos.
7

Publicar un peine cuidadosamente electroforesis en el gel, lo que garantiza una posición firme y en la orientación correcta. Electroforesis peines puede variar en gran medida en el número de dientes que tienen. Deje que el gel se seque durante aproximadamente 25 minutos
8

Sumergir el gel en el mismo tampón utilizado para preparar la solución agaorse -. En este caso, un tampón 1X. Sumergir el gel en un máximo de 5 ml de tampón.
Preparación y carga de ADN en el gel de agarosa de Análisis
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transferencia de 5 a 10 l de su muestra (s) a partir de sus tubos de reacción a tubos nuevos. En el caso de que desee utilizar la mezcla de reacción completa, un tubo nuevo no es necesario.
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Añadir tampón de carga de 0,2 X a cada uno de los tubos de muestras frescas que contiene la muestra de ADN para la carga.
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Retire el peine electroforesis lentamente, asegurándose de que no romper el gel o crear cualquier espacio entre la parte inferior del gel y la bandeja de gel.
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Añada cinco a 12 l de un marcador de ADN apropiado a la primera así creado por el peine de electroforesis. Sea o no un marcador de ADN es apropiado depende del tamaño de los fragmentos que se espera de su muestra.
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carga cinco a 10 l de las muestras en los pocillos restantes y añadir un igual importe del mismo marcador de ADN en la final también.
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Coloque los electrodos en la cámara de electroforesis, enchufando los cables en las tomas correctas en la cámara y establezca el electrodo 50 a 150 V.
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Deje que el gel se ejecute de una a cuatro horas.
Análisis de Resultados
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Retire el gel de la cámara de gel y colocarlo en una sala UV para la identificación visual, o lugar en una máquina que es capaz de tomar una fotografía del gel.
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Medir la distancia de los marcadores de la migración en sus pozos.
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Plot las distancias con respecto al tamaño de las bandas en el papel semilogarítmico y dibuja una línea de mejor ajuste.
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Calcule las distancias de sus bandas desconocidas.

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estimar los tamaños de las bandas desconocidas dibujando una línea a partir de la distancia recorrida por las bandas desconocidas que cumpla con la línea de mejor ajuste.
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Dibuja otra línea de este punto de encuentro hacia el eje de tamaño.