¿La prueba ELISA cambia un color oscuro como negro o gris a claro?
En una prueba ELISA se siguen una serie de pasos, que incluyen:
1. Recubrimiento de los pocillos de la microplaca con el anticuerpo de captura específico del analito objetivo.
2. Adición de la muestra o estándar que contiene el analito.
3. Pasos de incubación y lavado para permitir la unión del analito al anticuerpo de captura.
4. Adición de un anticuerpo de detección conjugado con una enzima (p. ej., peroxidasa de rábano picante o fosfatasa alcalina).
5. Pasos de incubación y lavado para permitir la unión del anticuerpo de detección al analito capturado.
6. Adición de un sustrato específico de la enzima utilizada en el conjugado del anticuerpo de detección.
7. Pasos de incubación y parada para permitir la reacción enzimática y el desarrollo del color.
El paso final da como resultado un cambio de color, que se puede medir espectrofotométricamente en una longitud de onda específica. El cambio de color suele ser de incoloro a un color visible, como amarillo, azul o rojo. La intensidad del color es proporcional a la cantidad de analito presente en la muestra.
Por lo tanto, en una prueba ELISA, el cambio de color es de incoloro a coloreado, no de oscuro (negro o gris) a transparente.