¿ELISA detecta la presencia del VIH?
A continuación se ofrece una descripción general de cómo se utiliza ELISA para la prueba del VIH:
Recubrimiento de antígeno:las placas de microtitulación están recubiertas con antígenos derivados de proteínas del VIH, como la glicoproteína de la envoltura (gp120, gp41) u otros componentes virales.
Adición de muestra:Se añaden muestras de suero o plasma diluidas a los pocillos de la placa recubierta de antígeno.
Reacción anticuerpo-antígeno:si hay anticuerpos contra el VIH presentes en la muestra, se unirán a los antígenos correspondientes recubiertos en la placa. Esto forma un complejo antígeno-anticuerpo.
Paso de lavado:Las sustancias no unidas, como el exceso de componentes de la muestra, se eliminan por lavado.
Anticuerpo secundario ligado a enzima:se agrega un anticuerpo secundario ligado a enzima específico para los anticuerpos del VIH capturados. Este anticuerpo está conjugado con una enzima, como la peroxidasa de rábano picante (HRP).
Adición de sustrato:se añade un sustrato específico de la enzima. En presencia de HRP, se produce una reacción colorimétrica o fluorescente.
Desarrollo del color:después de un período de incubación específico, el sustrato se convierte en un producto coloreado o fluorescente que puede detectarse y cuantificarse mediante un lector de ELISA.
Interpretación de los resultados:Se mide la densidad óptica (DO) o la intensidad de la fluorescencia para evaluar la cantidad de anticuerpos contra el VIH capturados en la muestra. Un resultado positivo indica la presencia de anticuerpos contra el VIH, lo que sugiere una posible infección por VIH. Se define un valor de corte para diferenciar entre resultados positivos y negativos.
ELISA se utiliza ampliamente en la detección y el diagnóstico del VIH, ya que proporciona un método relativamente simple, preciso y sensible para detectar anticuerpos contra el VIH. Sin embargo, cabe señalar que los resultados de ELISA a veces pueden requerir confirmación adicional con pruebas adicionales, como Western blot o pruebas de carga viral, para garantizar la precisión del diagnóstico.