células en cultivo son ya sea una forma cultivadas en suspensión , tales como células de la sangre , o células tales como fibroblastos que requieren una superficie a la que pueden adherirse . Algunas de las superficies de recubrimiento pueden requerir en diferentes matrices extracelulares dependiendo del tipo de célula y el estudio . Todos los cultivos celulares requieren que se realizarán son las condiciones asépticas. Ambiente óptimo

La mayoría de tipos de células puede cultivarse en medio de Eagle modificado de Dulbecco , ( DMEM ) o de Roswell Park Memorial Institute ( RPMI ) con la adición de suero de ternera fetal al 10 por ciento , 2 milimoles de la glutamina amino ácido y antibióticos , por ejemplo , 100 unidades de penicilina y 0,1 miligramos por mililitro de estreptomicina . Las células se mantienen en sus medios de comunicación en un incubador humidificado a 37 grados Celsius y un 5 por ciento de dióxido de carbono.
Splitting

Se comprobará diariamente durante la infección , la muerte o el crecimiento . Una vez que el frasco de cultivo de tejido es revestido en las células de un 80 por ciento , las células deben dividirse para mantener la salud de las células y la fase logarítmica de crecimiento . Medios se eliminan y las células se lavaron en solución salina tamponada con fosfato . Las células adherentes requieren la adición de tripsina y ácido etilendiaminotetraacético (EDTA ) para eliminar las proteínas de adhesión celular . Agitación suave debería eliminar las células . Necesidades de los medios que se añade para neutralizar la solución de tripsina /EDTA.

Subcultivo

Las células diluidas y solución tryspin /EDTA se puede centrifugar para sedimentar y lavado las células . Las células se pueden volver a suspender en los medios de comunicación y se diluyeron y se volvieron a sembrar en nuevos matraces . Cada vez que las células se dividen el número de pases de células se incrementa en uno .
Medios Cambio

medios debe ser cambiado dos veces a la semana mediante la eliminación de los viejos medios de comunicación y su sustitución con nuevo , calentado medios.