Cómo comparar Electroforesis en gel de ADN Métodos

La electroforesis en gel es una técnica estándar de separación de ADN , ARN o proteína a través de un gel usando una corriente eléctrica . Se utiliza la carga eléctrica de las moléculas para separarlas en un gel usando una corriente eléctrica . Agarosa

gel de agarosa es el método más común para la visualización de ADN . Diferentes porcentajes de agarosa se ​​pueden utilizar dependiendo del tamaño del ADN a ser visualizado . Un bajo porcentaje de agarosa , tal como 0,7 por ciento , tiene la resolución para visualizar grandes fragmentos de ADN . Un porcentaje más alto, tal como 2 por ciento , a menudo se utiliza para visualizar pequeños fragmentos de ADN . Para visualizar el ADN , el bromuro de etidio se utiliza a menudo como se intercala con el ADN y emite fluorescencia a la luz ultravioleta.

Poliacrilamida

geles de poliacrilamida se utilizan para fragmentos de ADN separados tan pequeñas como 10 pares de bases hasta 1 kb . Estos geles tienen un pequeño rango de separación , pero con una alta resolución . Sin embargo, también son más complicados de preparar. También es posible cargar grandes cantidades de ADN sin afectar a la resolución. Al igual que con agarosa, bromuro de etidio se utiliza a menudo para visualizar los fragmentos de ADN , pero poliacrilamida puede apagar la fluorescencia , lo que dificulta la visualización de pequeñas cantidades de ADN .
Pulse- Field Foto

Esta forma de electroforesis se utiliza para separar grandes moléculas de ADN y se utiliza a menudo para el genotipado . Grandes fragmentos de ADN migran a un ritmo similar . Puede ser difícil , por lo tanto , para resolver diferentes bandas . Electroforesis en campo pulsante alterna el campo eléctrico . Esto permite una mayor separación y resolución de la DNA.
Capilar

La electroforesis capilar es un método rápido y sensible para la separación de ADN. Pequeñas cantidades de ADN se pueden resolver . El ADN puede ser visualizado con etiquetado fluorescente o usando luz UV .
Desnaturalización

La separación de ADN puede ser complicado por su estructura . Es posible el uso de urea y formamida para destruir la estructura mediante la reducción del punto de fusión de ADN . Esto puede ser usado en ambos geles de agarosa y poliacrilamida .

Consideraciones

El método de electroforesis seleccionado dependerá del tamaño de los fragmentos de ADN que ser separados . ¿Cómo se utilizará el ADN después de la separación también determinará el método final .