¿Cómo se prepara la prueba de anticuerpos antinucleares?
La prueba de anticuerpos antinucleares (ANA) es una prueba de laboratorio que se utiliza para detectar la presencia de anticuerpos en la sangre de una persona que están dirigidos contra sus propios núcleos celulares. La prueba se realiza comúnmente para ayudar en el diagnóstico de enfermedades autoinmunes, en particular el lupus eritematoso sistémico (LES). A continuación se ofrece una descripción general de cómo se prepara la prueba ANA:
1. Recolección de sangre:
- Se extrae una muestra de sangre de una vena del brazo del paciente.
- La sangre se recoge en un tubo o vial que contiene un anticoagulante para evitar que se coagule.
- Luego, la muestra de sangre se envía a un laboratorio para su análisis.
2. Separación de suero:
- La muestra de sangre se centrifuga para separar los glóbulos rojos del suero.
- El suero, que contiene los anticuerpos de interés, se recoge y se utiliza para análisis posteriores.
3. Preparación del sustrato:
- Los portaobjetos de vidrio para microscopio se recubren con un sustrato que contiene antígenos nucleares.
- Estos antígenos nucleares normalmente se extraen de tejidos animales, como el hígado o el riñón, o de células humanas cultivadas.
4. Incubación de suero:
- El suero del paciente se diluye y se añade a los portaobjetos recubiertos con antígenos nucleares.
- Los portaobjetos se incuban durante un período específico, lo que permite que los anticuerpos del suero se unan a los antígenos nucleares de los portaobjetos.
5. Lavado:
- Después de la incubación, los portaobjetos se lavan minuciosamente para eliminar los anticuerpos no unidos y otras sustancias.
6. Detección:
- Se añade a los portaobjetos un anticuerpo secundario fluorescente o marcado con enzima.
- El anticuerpo secundario es específico de las inmunoglobulinas humanas y se unirá a los anticuerpos del paciente que se hayan adherido a los antígenos nucleares.
- Si hay anticuerpos antinucleares en el suero del paciente, se unirán a los antígenos nucleares de los portaobjetos y, posteriormente, el anticuerpo secundario se unirá a ellos, creando señales visibles.
7. Visualización e Interpretación:
- Los portaobjetos se examinan al microscopio de fluorescencia o mediante otros métodos de detección adecuados.
- La presencia, el patrón y la intensidad de las señales fluorescentes son analizados e interpretados por un patólogo o profesional de laboratorio.
Los resultados de la prueba ANA se informan como positivos o negativos, y el patrón específico de fluorescencia puede proporcionar información adicional que ayuda en el diagnóstico de enfermedades autoinmunes. Un resultado positivo de la prueba ANA no necesariamente indica una enfermedad específica, pero puede ser una herramienta valiosa en la evaluación de pacientes con sospecha de enfermedades autoinmunes.