Cuál es la función de seguimiento de tinte en gel de electroforesis
Para separar fragmentos de ADN , con el fin de medir su tamaño o para aislar un fragmento en particular , los científicos ponen de ADN en un gel de agarosa sumergido en una solución que se carga con una corriente eléctrica . La corriente empuja los fragmentos de ADN a través del gel , y porque el gel es porosa , de ADN más pequeños fragmentos de gusano de su camino a través de más rápidamente . Ellos viajan más lejos que los fragmentos más grandes en la misma cantidad de tiempo.
Propósito
ADN es incoloro cuando se encuentra en solución en un tubo de ensayo. Para hacer la muestra más fáciles de ver , tanto en el tubo de ensayo y en el gel, se agrega un colorante guía de color a la muestra. El tinte no afecta al ADN en absoluto.
Tracking
El tinte de seguimiento habitual es azul de bromofenol en una solución de glicerol al 50 por ciento. Bromofenol colores azul el azul brillante de la muestra de manera que es fácil de seguir su progreso a través del gel . Cuando el tinte de seguimiento ha viajado alrededor de 3/4 de la longitud del gel , es hora de apagar la corriente eléctrica.
Densidad
El tinte de seguimiento es densa debido a su alta concentración de glicerol . Eso hace que las muestras de ADN se hunden en las ranuras de carga de gel , en lugar de flotando en la solución por encima del gel que transporta la corriente eléctrica .
Migración del colorante
bromofenol azul migra a través de una solución de agarosa a aproximadamente la misma velocidad que una cadena de ADN que contiene 300 pares de bases . Si desea realizar un seguimiento del progreso de las hebras de ADN más grandes , puede utilizar un tinte de seguimiento con xilenocianol , que migra a aproximadamente la misma velocidad que una cadena de ADN con 4000 pares de bases.