biotinilación es el proceso de vincular biotina , o vitamina H , a una proteína u otras moléculas . Este procedimiento científico se utiliza sobre todo en la biotecnología y la investigación de la biología molecular que interviene el ADN , las proteínas y antígenos , que son moléculas del sistema inmune del cuerpo reconoce como invasores . Protocolos de biotinilación incluyen la biotinilación de anticuerpos y péptidos , así como la biotinilación de la superficie celular . La biotinilación de anticuerpos

Para enlazar biotina a las proteínas a producir anticuerpos cuando un antígeno entra en el cuerpo , los técnicos utilizan bicarbonato de sodio ( NaHC03 ) a pH 9 ; sulfóxido de dimetilo ( DMSO ) ;

NHS - biotina y una sustancia llamada solución salina PBS . Las muestras se mezclan con bicarbonato de sodio , que más tarde se añade a NHS - biotina en DMSO . La solución se añade a continuación a los anticuerpos analizados y se incubó en una pieza de equipo llamado un rotador durante cuatro horas a temperatura ambiente o durante la noche a 39,2 grados Fahrenheit . Por último , la solución se diluye con PBS .
La superficie celular biotinilación

En el protocolo de biotinilación de la superficie celular , los técnicos utilizan cultivo de tejidos , solución salina tamponada con fosfato ( PBS) a pH 7,4 y sulfosuccinimidil - 2 - etil- 1 solución tampón ( biotinamido ) ,3- ditiopropionato para equilibrar la acidez que contiene grupos amino y TrisCl , de acuerdo con Current Protocols in Proteína células Science.The se mezclan con la biotina y la solución tampón , se decantó y se centrifugó . Contenido de materiales sólidos y proteínas específicas se analizan más adelante en una placa de electroforesis en gel.
Biotinilación de Péptidos

Para realizar la biotinilación de péptidos , el reactivo utilizado es el NHS -SS biotina, según Philip Shepherd en " Anticuerpos monoclonales : Un enfoque práctico . " Los péptidos son fragmentos cortos de aminoácidos, las moléculas que forman las proteínas y el ADN . En este protocolo, la solución comercial NHS- SS La biotina se disuelve en agua. A continuación, la muestra de péptido se añade a la misma , junto con bicarbonato de sodio para equilibrar la acidez o el pH . La solución se incuba a continuación en hielo durante dos horas. Los técnicos pueden observar la muestra con o sin las moléculas de biotina .