Procedimientos de extracción de ADN
Lisis Celular
lisis es la acción por la cual las células se rompen literalmente , provocando su contenido se derrame hacia fuera para su análisis. Las células que contienen la muestra de ADN que se extrae se deben abrir , permitiendo así el acceso nos al lisado o el líquido en su interior. Esto se consigue mediante varios métodos , el más común de los cuales está sonicación . La sonicación es el proceso por el cual condensa sonido se aplica a las células , por lo tanto agitar y rompiendo sus reacciones intermoleculares . Otros métodos para inducir la lisis incluyen la introducción de un virus, que la rompe abrir desde el interior; enzimas que se comen en su superficie; y la ósmosis , que consiste en colocar las células en agua , permitiendo que el fluido dentro de ellos para que su distancia al exterior , donde se puede extraer .
extracción de la membrana
Siguiente , los lípidos alrededor de la membrana de la célula debe ser eliminado . Los lípidos son tipos de grasas , ceras , monoglicéridos , fosfolípidos y otras sustancias moleculares que ocurren naturalmente utilizados como componentes estructurales a las membranas celulares , dándoles cierta rigidez . Estos se quitan lavando lisado de las células en una solución de detergente , por lo general una forma de ácido crómico .
Eliminación de proteínas
Después de los lípidos se han eliminado con éxito de la lisado , ahora es importante eliminar las proteínas restantes . Esto se logra mediante la adición de lo que se conoce como una proteasa . Una proteasa es una enzima especial diseñado para romper las proteínas dadas. Esta acción se denomina proteólisis , mientras que la proteasa provoca la hidrólisis (descomposición ) de los bonos que tienen aminoácidos juntos. Los aminoácidos forman las proteínas , y sin su configuración, la proteína se descompone.
Precipitante
Es finalmente hora para ver el ADN puro . Esto puede hacerse sumergiendo el lisado en alcohol enfriado con hielo , generalmente etanol . Dado que el ADN es insoluble en alcohol , se amontonan . Cuando la mezcla se agitó con una cuchara de metal , el ADN se visiblemente envolver alrededor del metal , que se asemeja de algodón blanco . Esto se conoce como la precipitación , con el ADN conocida como precipitado de ADN .
Isopropanol
Junto con etanol, isopropanol también se utiliza ocasionalmente no extraer precipitado de ADN . En el lado positivo , es más eficiente que el etanol , obteniéndose una mayor concentración de ADN cuando se utiliza . Sin embargo, también es mucho menos volátil y requiere más tiempo para secarse . También se puede señalar que el ADN puede no adherirse así a la cuchara o tubo cuando se utiliza isopropanol .