Descripción de una tuberculosis Tinción de Gram
Mycobacterium tuberculosis es una forma de barra ( bacilos ) , no móviles , no sporing , obligar aerobio . Miden micrómetros 0.4x3 de longitud. Mycobacterium tuberculosis se somete a fisión binaria ( división celular reproductiva ) cada 15 a 24 horas , que es lento en comparación con otras bacterias . Debido a esto, la micobacteria puede tomar hasta nueve semanas para aparecer en los medios de cultivo .
Mycobacterium tuberculosis es sensible a la luz UV y al calor (por ejemplo, la pasteurización ) , pero resistente a los desinfectantes químicos .
Gram Stain
Mycobacterium tuberculosis no puede realmente ser clasificado como gram positivo o gram negativo. La clasificación gramo se basa en la cantidad de peptidoglicano en la pared celular de una bacteria . Una bacteria gram positiva tiene una capa de peptidoglicano de espesor (alrededor de 90 por ciento ) , mientras que una bacteria gram negativa tiene una delgada capa de peptidoglicano ( 5-20 por ciento ) . Los colorantes gram penetran en la pared celular y se unen con los componentes químicos en la pared celular . Las bacterias teñidas aparecerán de color púrpura o rosa bajo el microscopio .
Por Mycobacterium tuberculosis , la pared celular se compone de lípidos peptidoglicano pero también complejos , que inhiben la penetración del colorante gramo. La pared celular también se resiste a la decoloración por el ácido o alcohol, por lo que la micobacteria se denomina " ácido-alcohol resistentes . " Los lípidos de la pared celular son los ácidos micólicos , factor de cordón y cera -D. Si las bacterias debían ser manchado, las células bacterianas se aparecen débilmente grampositivos o pálido , con muy poco color.
Para visualizar las bacterias , manchas especiales, como la mancha Aumarine o la mancha Zhiel - Neelson deben ser realizado .
mancha auramina - rodamina
El proceso auramina - rodamina utiliza un tinte amarillo fluorescente para visualizar Mycobacterium tuberculosis en un microscopio de fluorescencia. El permanganato de potasio o naranja de acridina se pueden utilizar como contratinción . Bajo la lente, las células bacterianas aparecerán en verde.
La mancha auramina - rodamina es más sensible que la Zhiel - Neelson y más rentable.
Ziehl- Neelson mancha
La tinción de Ziehl - Neelson originó a partir de los científicos Franz Ziehl y Friedrich Neelsen . Utiliza fuschin carbol climatizada, alta concentración de ácido - alcohol y un colorante de contraste , tales como verde malaquita o azul de metileno. Bajo un microscopio de fluorescencia, las células bacterianas se aparecen de color rosa brillante .
Ziehl - Neelson es el estándar de oro para la identificación primaria de Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae .
Agar
secundaria a la microscopía de identificación , Mycobacterium tuberculosis debe ser cultivado en agar de cultivo especiales . Agar Lowenstein -Jensen tiene sustancias orgánicas complejas (por ejemplo, huevos , papas ) , sales , glicerol y verde malaquita (inhibe otras bacterias ) . Los antibióticos pueden ser añadidos para inhibir aún más bacterias contaminantes . La muestra se coloca en esta agar , y las bacterias crecen en tres a nueve semanas.
Una solución de cultivo de nutrientes tales como la albúmina y la biotina se puede usar para apoyar el crecimiento de incluso la cantidad más pequeña de las bacterias diana . Esto se conoce como Middlebrook 7H9 (o 7H12 ) medio .
Las colonias aparecen como pequeñas pulidas , colonias de color marrón , la luz en ambos.
Con tecnología avanzada, Mycobacterium tuberculosis ahora se puede cultivar utilizando un lector automatizado . Una solución líquida de medio Middlebrook 7H9 y un compuesto indicador fluorescente se utiliza para vigilar el crecimiento y reportar la infección positiva o negativa.