Co- inmunoprecipitación Protocolo

Protocolo Co- inmunoprecipitación (Co - IP ) es un procedimiento ampliamente utilizado para analizar la interacción de proteínas . El procedimiento se compone en general de tres pasos . Un anticuerpo se introduce en un lisado celular , el complejo de proteína - anticuerpo se une químicamente y la proteína se determina mediante un análisis . Resumen Co - inmunoprecipitación

Co - IP se compone de una serie de medidas para asegurar resultados exactos de la prueba . El primer paso requiere un anticuerpo específico para la proteína a ser añadido . En la etapa segunda , la proteína - G o proteína A-Sepharose se utiliza para enlazar el complejo anticuerpo-proteína . Por último , la secuenciación de una banda de proteína purificada , o el análisis de transferencia Western , se utiliza para identificar la proteína co - precipitado . Pasos
generales

El protocolo se puede dividir en tres pasos generales en término de la mecánica del proceso . El primer paso es el flujo de trabajo para completar el procedimiento en la menor cantidad de tiempo . El segundo paso consiste en consideraciones generales para el procedimiento. El paso final es la solución de problemas .
Pasos Específicos

El flujo de trabajo se inicia con la preparación del cultivo para el análisis secante y concluye con la determinación de la presencia de cualquier proteínas . Consideraciones generales consisten en pasos clave tales como la limpieza previa , la elección de los tampones y selección de Proteína A o Proteína G de la resina . Solución de problemas se ocupa de cuestiones tales no detección de la proteína , la unión de los anticuerpos a las proteínas , fragmentos de anticuerpos y la posibilidad de un éxito Co- IP .