Protocolo para una tinción DAPI

DAPI representa la química 4' - 6 - diamidino - 2 - fenilindol , y se utiliza para teñir el ADN de doble cadena . El compuesto forma complejos fluorescentes azules con núcleos de las células y por lo tanto se utiliza comúnmente para resaltar la estructura de las células . El tipo y la densidad de tinción también pueden identificar células muertas o moribundas . Preparación de la solución de DAPI

La solución DAPI primero debe ser diluido a una solución de trabajo . Por ejemplo , 10 mg del producto Invitrogen DAPI se debe mezclar con 2 ml de agua desionizada , y después se diluyó aún más a 300 concentración de nano - molar ( direcciones estarán presentes en el producto ) con solución salina tamponada con fosfato (PBS ) .

Preparación de la muestra

Fijar la muestra según corresponda al tipo de muestra a analizar en un portaobjetos . Añadir 300 microlitros de la solución de trabajo de DAPI a la muestra e incubar durante uno a cinco minutos . Enjuague el portaobjetos con PBS.
Analizar

Utilice un microscopio de fluorescencia para observar la muestra de diapositivas montadas . Los núcleos teñidos con DAPI se pueden identificar por una fluorescencia azul.