Cómo medir Protein Expression

medida Expresión de proteínas puede proporcionar pistas sobre la actividad de los genes en su cuerpo , ya que las proteínas funcionan como catalizador final de las actividades celulares. Sin embargo , según un artículo publicado en la edición de marzo 2010 de la " LabMedicine ", patólogos y biólogos están aún a un acuerdo sobre la microscopía de campo claro o microscopía de fluorescencia como el método más adecuado para medir la expresión de proteínas. La exploración de campo claro Whole- deslizante no sólo es fácil de usar y proporciona la estabilidad cromógeno , pero puede proteger láminas de vidrio más largo. Cosas que necesitará
tejido celular
Slide
anticuerpo secundario biotinilado
peroxidasa de rábano - estreptavidina
3,3 '- diaminobencidina
cámara Color- line scan
Mostrar Más instrucciones Matemáticas 1

Coloque el tejido celular en una diapositiva y agregue un anticuerpo secundario biotinilado , seguido por una peroxidasa de rábano - estreptavidina y esperar durante dos minutos.
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Vierta cuatro gotas de la 3,3 '- diaminobencidina en la muestra y esperar dos minutos para que la mancha marrón a extenderse por completo de la muestra .
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Coloque un corte histológico del teñido espécimen en una plataforma motorizada en una habitación bien iluminada. Ajuste con cuidado la cámara de línea de escaneo en color a 20X o 40X y escanear la muestra. Alinear las franjas de la imagen y comprimir la imagen digital en un archivo legible.
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Imprima la imagen digital para el análisis manual o alimentar a la imagen en el software de la computadora para el análisis de la tecnología asistida . Observe el patrón de las manchas que se presentan en la imagen . Analizar cuidadosamente la expresión de proteínas sobre la base de los patrones de las manchas en la muestra.
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Evaluar la expresión de la proteína en las células cancerosas y el estroma mediante el examen de la concentración de proteína expresada en el tejido celular .

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utilizar los patrones de color para cuantificar la expresión de la proteína en una escala de 0 a 3 + . Use el marcador para calcular HER- calificación o el puntaje Allred .