El estudio de las proteínas es un procedimiento importante en la biología , llevado a cabo en los dos laboratorios de diagnóstico y de investigación en la academia y en la industria. Análisis de la expresión de proteínas de diagnóstico se utiliza para detectar la presencia de enfermedades o condiciones fisiológicas anormales . En la investigación se utiliza en la producción de proteínas bio-ingeniería para estudios científicos o en el desarrollo de fármacos . Protein Expression

La expresión de las proteínas es muy simplemente la producción de una proteína a partir de una secuencia de aminoácidos definida , que es a su vez determinada por una secuencia de gen definido . La comprensión de estas secuencias permite a un investigador para modificar una proteína en forma de varios - por ejemplo , mediante la colocación de una etiqueta fluorescente en la proteína de modo que se puede detectar , o mediante la eliminación de porciones de la proteína que pueden interferir con su producción o procesamiento por una célula .

Métodos y Herramientas para el análisis de expresión proteica

expresión de la proteína se analizó mediante el uso de tecnologías y procedimientos , tales como ELISA , inmunoensayos , espectrometría de masas altamente sofisticadas y especializadas , y de formación de imágenes . En la mayoría de los casos, la proteína se detecta indirectamente - por ejemplo , mediante el uso de un anticuerpo que se une a la misma y a continuación, utilizando un sistema de detección secundaria de visualizarlo . Una técnica de detección de la proteína básica es la de Western Blot , durante el cual una proteína se ejecuta a través de un gel de agarosa y después se transfirió a una membrana . Es entonces " sondeó " al permitir que un anticuerpo se una a él , y el anticuerpo se hace reaccionar a continuación con una solución química , tal como una tinción de plata , para producir una imagen de la ubicación de la proteína en la transferencia . Esto da una indicación del tamaño de la proteína y si está presente como múltiples o individuales unidades . Otro método comúnmente utilizado es la detección fluorescente . La unión de un anticuerpo marcado con una partícula fluorescente de la proteína se permitirá que sea visualizado por microscopía .
El propósito de analizar la expresión proteica

Estudiar la expresión de una proteína da un investigador una indicación de donde se produce ( es decir , su patrón de expresión y la localización ) o sus cantidades ( es decir , su tejido o los niveles celulares ) . Esta información se utiliza en la patología de diagnóstico en , por ejemplo , la detección de proteínas en orina para determinar si un paciente tiene enfermedades renales tales como la enfermedad renal tubular o la nefropatía diabética . En los laboratorios de genética experimentos de clonación de genes suelen generar recombinantes ( genéticamente alterados ) de proteínas . El análisis de estas moléculas sintéticas es crucial en la verificación de secuencias de genes o la comprobación de mutaciones que pueden o no pueden ser deseables . Por ejemplo , las vacunas son proteínas producidas por unidades artificialmente modificados de los genes . Estas proteínas deben ser analizados cuidadosamente para asegurar que los genes fueron alterados en el camino correcto y deseado, a fin de evitar efectos secundarios no deseados o efectos tóxicos.
Expresión de Proteínas Análisis por Western Blot

El análisis de la expresión de proteínas utilizando el Western Blot es un procedimiento de laboratorio muy realizada de forma rutinaria con el fin de que los científicos evalúan la clonación de genes y la producción de proteínas recombinantes . Por ejemplo , en la biología molecular y la ingeniería genética , los genes de diferentes especies (por ejemplo, ratón y humano ) se unen entre sí y se colocaron en una célula bacteriana , que es capaz de expresar la proteína . Con el fin de asegurar que se está generando la proteína correcta , su expresión debe ser analizada por Western Blot . Western Blot se utiliza también en la patología médica para diagnosticar la enfermedad de las vacas locas y el VIH .
Expresión de Proteínas Análisis por Citometría de Flujo

Citometría de flujo requiere células que se tiñeron con un anticuerpo fluorescente , que se une a una proteína expresada en la superficie de , o dentro de , una célula . Se utiliza en la investigación farmacéutica para encontrar moléculas (citoquinas) que son únicos para un conjunto específico de las células y que participan en la señalización celular y la comunicación. Esto es importante para que el efecto de los fármacos sobre la fisiología normal de las células y la función puede ser monitoreado durante el desarrollo de medicamentos y ensayos clínicos.