Teoría de lisis alcalina
El protocolo de lisis alcalina consiste en una serie de soluciones de agregados a un sedimento bacteriano que contiene ADN plásmido . El aumento de la alcalinidad de la solución hace que las células revienten. Este método de extracción protege el ADN plásmido mientras destruye el ADN genómico y la desnaturalización de las proteínas celulares para proporcionar científico con una muestra relativamente pura .
SDS y NaOH
alcalina describe el dos principales productos químicos utilizados para causar la lisis de las células individuales . Dodecil de sodio ( lauril ) sulfato ( SDS ) es un detergente que desestabilizó la celda mediante la creación de agujeros en la membrana celular. El hidróxido de sodio (NaOH ) añade en la descomposición de la pared celular haciendo que la célula a desintegrarse y liberar su material genético en solución.
ADN plásmido Por qué sobrevive
Una propiedad adicional de NaOH en el protocolo de lisis alcalina es interrumpir el enlace de hidrógeno entre pares de bases de ADN . Esto desnaturaliza el ADN genómico y ADN de plásmido a cadenas simples . La adición de acetato de potasio a la solución neutraliza la alcalinidad y el ADN plásmido pequeño es capaz de volver a la naturaleza y disolver en la solución . El ADN genómico es demasiado grande para volver a la naturaleza de toda su longitud . Ella y las proteínas desnaturalizadas precipitan durante la centrifugación dejando el ADN plásmido en solución.