Definición de radiación híbrido
mapeo de híbridos de radiación es un proceso de ingeniería genética que fue desarrollado originalmente para la construcción de mapas de largo alcance de los cromosomas de mamíferos y descubrir la ubicación de marcadores genéticos con relación a otra . Mapeo de híbridos de radiación se basa en un modelo estadístico para medir las distancias entre los marcadores de ácido desoxirribonucleico (ADN) y el orden en los cromosomas . Marcadores de ADN son muy cortos . Secuencias de ADN cíclicos están contenidas dentro de un genoma . Mapeo de híbridos de radiación ha demostrado ser indispensable para la localización de genes de enfermedades humanas en el genoma. La ubicación relativa de estos marcadores de ADN puede ser unió en un mapa físico conocido como un mapa genético .
Pasos de Radiación técnica híbrida
El primer paso de la radiación híbrido técnica implica la amplificación y purificación de ADN similar a la primera etapa en cualquier proyecto de secuenciación . Entonces se emplea radiación para dividir el ADN en segmentos más pequeños y estos segmentos se incorporan en una célula híbrida . La célula de radiación híbrido se cultiva a continuación, ser cultivadas en grandes cantidades . Reacción en cadena de polimerasa ( PCR) y análisis de ligamiento se utilizan para resolver la distancia entre los marcadores de ADN . Usted puede comprobar fácilmente la presencia de varios marcadores genéticos. Cuanto más cerca de los dos marcadores genéticos son el uno al otro , menor es la probabilidad de que ser separados por la radiación al ADN división.
Procedimiento /foto Técnica
el procedimiento de la técnica de híbridos de radiación implica el uso de dos líneas de células diferentes que son incapaces de sobrevivir en un medio tóxico . Sin embargo, contienen genes que pueden resistir los medios de comunicación tóxico cuando se combina en una sola celda ( debido a la producción de una enzima resistente a la toxina ) . La línea celular en estudio se irradia (generalmente por rayos X ), causando roturas en el ADN. Esto hace que el cromosoma a rompe en varios segmentos que son posteriormente fusionados o integrado con la otra línea celular , la producción de un híbrido . Desde el híbrido ha incorporado genes de ambas líneas celulares y puede producir la enzima requerida , sobrevivirá en los medios tóxicos.
Cultivo
La célula híbrida que puede sobrevivir ahora se cultiva en grandes cantidades . Esto amplifica el ADN heredado de la línea de células irradiadas . La muestra resultante se somete a PCR para amplificar dos marcadores genéticos específicos . Mediante la ejecución de los productos de PCR en un gel , se puede verificar si ambos marcadores se incorporan en la línea celular resultante. Las frecuencias con las que los marcadores de ADN son retenidas en cada clon (muestra cultivada ) se pueden calcular utilizando métodos estadísticos .
Aplicación
Los mapas generados de los cromosomas de las múltiples especies tales como seres humanos , rata , ratón y otros genomas facilitar la generación de mapas muy detallados y precisos utilizados para el estudio de enfermedades multifactoriales . Otras aplicaciones incluyen la determinación de las localizaciones cromosómicas de 26 de larga duración cDNAs novedosos humanos (ADN cromosómico ) .