¿Por qué se realiza la trituración en la prueba de peroxidación lipídica TCA?

En el ensayo de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) para la peroxidación lipídica, la trituración de la muestra de tejido se realiza por varias razones:

Para facilitar la homogeneización:triturar la muestra de tejido ayuda a descomponer las estructuras celulares y liberar los lípidos en el medio circundante. Este proceso de homogeneización garantiza que los lípidos se distribuyan uniformemente y sean accesibles para reaccionar con el ácido tiobarbitúrico (TBA).

Para mejorar la extracción de lípidos:triturar la muestra de tejido aumenta la superficie de los lípidos, lo que permite una mejor extracción en el disolvente orgánico (normalmente una mezcla de cloroformo y metanol) utilizado en el ensayo TBARS. Este paso es crucial para aislar los lípidos de otros componentes celulares y facilitar su reacción con TBA.

Para liberar productos de peroxidación lipídica:triturar la muestra de tejido puede ayudar a liberar productos de peroxidación lipídica, como el malondialdehído (MDA), que a menudo están unidos a proteínas celulares u otras macromoléculas. Al romper estos enlaces, la trituración permite la liberación y posterior cuantificación de MDA y otros TBARS.

Al triturar la muestra de tejido, se optimizan la homogeneización, la extracción de lípidos y la liberación de productos de peroxidación lipídica, lo que conduce a mediciones más precisas y confiables de la peroxidación lipídica en el ensayo TBARS.